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    siRNA/miRNA合成
    南宮娛樂優勢

    1.質量保證 :可進行科學的序列設計 ,針對某靶基因設計的3條siRNA可保證其中兩條的Knockdown效率達到70%(在轉染效率大於80%的情況下)

    2.siRNA oligo均由HPLC純化 ,100%除去尚未配對的單鏈 ,多種修飾選擇 :末端修飾(FAM ,Biotin等) ,堿基修飾(2’-OMe)

    原理
    在RNAi效應階段,siRNA雙鏈結合一個核酶複合物從而形成所謂RNA誘導沉默複合物(RNA-induced silencing complex, RISC) 。激活的RISC通過堿基配對定位到同源mRNA轉錄本上 ,並在距離siRNA3’端12個堿基的位置切割mRNA 。
    化學合成的siRNA具有操作簡便、轉染效率高 、對細胞的或者組織的毒副作用小 、可大規模製備等優點 ,特別適用於基因靶位點不確定情況下 ,進行siRNA有效片段的篩選 。
    服務流程

    1.客戶提供 :siRNA oligo的序列信息或相應的靶基因信息(便於設計) ,以及技術要求(包括OD和nmols的精確數量 、純化類型 、修飾要求等)

    2.根據序列信息 ,進行化學合成 ;

    3.HPLC純化 ;經過分光光度計精確定量

    4.凍幹處理

    5.南宮娛樂提供 :長度19-23堿基/鏈的siRNA ,產品形式為退火的雙鏈RNA的凍幹粉 ,有以下選擇

    6.普通siRNA

    7.化學修飾siRNA-利用2’-Fluoro或2’-OMe修飾以提高siRNA在血清和培養基中的穩定性 ;作用時間長於普通siRNA ;熒光標記siRNA

    8.siRNA對照 ,包括普通陰性對照(與目的靶細胞中所有基因無同源性的陰性對照) 、熒光標記的陰性對照(方便在熒光顯微鏡下觀察轉染的效率 ,有利於優化轉染條件)和siRNA陽性對照(作為一個實驗係統檢查 ,確保在實驗方法中您的轉染 、RNA提取物和檢測方法是可靠的 ;常用的siRNA陽性對照有LaminA/C ,Beta-Actin ,P53 ,GAPDH等)

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